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生理条件下对乳猪小肠内乳糖代谢的研究

时间:2011-07-25 09:59:31  来源:  作者:朱曲波
朱曲波2]张勤[1]刘文宗[2]刘宗慧[3]刘琪[3]王维林[2]
1]中国农业大学动物科技学院   北京 100085
2]西南大学动物科技学院       重庆荣昌 402460
3]重庆畜牧科学研究院         重庆荣昌 402460
摘要:本研究采用随机设计。选取5日龄荣昌乳猪5窝共计15头,随机分成3组(即母畜母乳喂养组IM、添加外源性乳糖人工代养组TM、不添加乳糖人工代养组M),于15日龄宰杀,取出小肠并结扎幽门部与回-盲部,等分幽门部至回-盲部之间的小肠为五段并结扎,测定乳猪酮体重、小肠长度和小肠重量;收集每段肠腔内容物和粘膜,分析其乳糖和葡萄糖的浓度;抽取股动脉血液、肝门血液和左心室血液,测定其葡萄糖浓度。结果显示:母畜母乳喂养组(IM)乳猪的生长速度明显高于非母畜母乳喂养组(TM和M)乳猪1.1~1.2倍(P<0.01);小肠粘膜和内容物中的葡萄糖浓度主要集中在十二指肠段和空肠前段。组间变化M>TM>IM;血糖检验结果:肝门>左心室>股动脉(P<0.01),表明在机体的不同部位血糖浓度是不同的,解剖学结构上离肝脏越远葡萄糖浓度相对越低。在组间差异性中,肝门部位血糖IM<M<TM;左心室血糖IM>TM>M;股动脉血糖IM>M>TM,但都没有显著的差异性。
   AbstractIn this study,one adopts the design of random. 15 5-day old sucking piglets collected from five litters of RongChang swine were divided at random into 3 groups, and feed with matrix (IM group) , high-lactose food (TM group), non-lactose food (M group) respectively. All piglets were euthanasia at the age of 10 days, and the small intestine were cut into five equal length segments. But the weight of the body, the weight and length of intestine , the content of lactose and glucose of each segment , and the glucose content of blood taken from the portal fissure, left heart chamber and arteria femoralis were the key items to be test in the second experiment. The results manifested that the growth speed of the sucking pigs feed on milk is 1.1—1.2 times higher than those feed on other materials other than milk(P<0.01), and the intestinal mucosa and glucose mainly concentrate in duodenum and the front segment of intestinum jejunum in each group , but the group difference is M> TM > TM; the variation of blood glucose is portal fissure > left heart chamber > arteria body , parts have different concentration of blood sugar in the portal fissure is IM > M > TM; in the left heart chamber, IM > M > TM; in arteria femoralis, IM > M > TM, there is no significant difference among different groups.
关键词   乳猪 乳糖 研究
乳糖作为幼畜能量重要来源,是开饲前主要的碳水化合物,在哺乳仔猪生长代谢中起着重要的作用。但是随着哺乳动物年龄的增长(特别是断奶以后),许多哺乳动物的小肠内缺乏乳糖分解酶——β-半乳糖苷酶,从而导致小肠内的乳糖无法得到及时水解和利用,造成乳糖不耐或乳糖吸收不良,致使断奶仔猪出现腹泻等病症。为探索乳糖在哺乳仔猪体内的消化代谢规律,本研究分析了三种乳糖水平日粮中,乳糖在乳猪体内分解代谢规律,揭示乳糖在哺乳仔猪体内的消化机制,为解决哺乳动物因乳糖引起的消化不良或不适症提供一定的参考。          
1 材料与方法
1.1 试验处理、仪器及药品 
1.1.1 试验处理
五日龄荣昌乳猪,来源于重庆市养猪科学研究院育种猪场,正常免疫,补铁,无拉稀及其他疾病。称取并记录初始体重。
试验采用随机设计。随机选取5窝,每窝选出体重相近者3头,随机分成3组:
第一组:母猪哺乳组(IM组),由哺乳母猪喂养,母乳乳糖浓度为5.48%;
第二组:添加外源性乳糖人工代养组(TM组):饲料配方鸡蛋1个,乳清粉25g,乳糖10g,加水350ml煮沸。测得乳糖水平为10.85%;
第三组:不添加乳糖人工代养组(M组):饲料配方玉米粉25g,豆粕粉25g,葡萄糖20g,加水350ml煮沸。测得乳糖水平为0%
1.1.2 饲养管理
挑选作为试验用的乳猪中,IM组由母猪正常带喂,若母猪拒哺可采用人工手段建立母仔“感情”; TM组和M组于第5日开始诱食,若拒食可采用饥饿法并人工灌喂方式。每日间隔4小时自由采食1次,自由饮水。饲喂10天,宰杀日龄均为15日龄。
1.1.3 主要仪器
紫外可见光分光仪(S53/54—型,上海棱光技术有限公司生产)、自动生化分析仪(7020—型,日产)、1cm比色管、离心机(5000r/min);电子天平;冰箱等等。以上仪器由重庆市养猪科学研究院养猪科学重点实验室提供。
1.1.4 主要药品
苯酚、亚砷酸钠、苦味酸、三氯醋酸、氢氧化钠;乳糖标准液等,以上药品由重庆市养猪科学研究院养猪科学重点实验室从重庆医药公司购买提供。
葡萄糖GOD-PAP法检测试剂盒购于四川省迈克科技有限责任公司。   
1.2 样品的采集与处理 
所有乳猪在试验结束进行称重。饲喂到宰杀日龄后进行宰杀.宰杀方法是:先用湿布捂住乳猪的口鼻,使其窒息,迅速采集股动脉血液、肝门部位血液和左心室血液。然后取出肠道,置于冰水浴的0.9%生理盐水中。剥离肠系膜进行小肠结扎并分段,将胃幽门至回-盲部之间的小肠等分为5段,分别代表十二指肠段(Duodenum)、空肠前段(Proximal jejunum)、空肠后段(Distal jejunum)、回肠前段(Proximal ileum)、回肠后段(Distal ileum)。剪开肠管,收集肠腔内容物和用载玻片刮取的粘膜一并称重,用于生化分析乳糖和葡萄糖(glucose)浓度。  
1.3 测定项目及方法
1.3.1 乳糖浓度测定  参照文献[1]介绍的方法进行,用三氯醋酸作蛋白质沉淀剂,在苯酚和氢氧化钠存在的碱性条件下,于沸水浴中乳糖与苦味酸反应显色(棕色),再用分光光度仪测定吸光度OD420值。
1.3.2 乳糖标准曲线的测绘 将乳糖准确配制成1%,1.5%,2%,2.5%,3%,3.5% ,4% 七个浓度梯度,按1.3.1所述方法测定OD520以X为吸光度,Y为乳糖浓度(g/100ml),将测得的数据求得回归方程。
1.3.3 葡萄糖浓度测定
葡萄糖浓度测定方法按四川省迈克科技有限责任公司提供的说明书进行,其原理是:
ß-D-葡萄糖+O2+H2O" D-葡萄糖酸+H2O2
H2O24-AAP+酚" 2H2O+红色醌类化合物  
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